DNA純度、緩沖液、溫度條件及限制性內(nèi)切酶本身都會(huì)影響限制性內(nèi)切酶的活性。大部分限制性內(nèi)切酶不受RNA或單鏈DNA的影響。當(dāng)微量的污染物進(jìn)入限制性內(nèi)切酶貯存液中時(shí)，會(huì)影響其進(jìn)一步使用，因此在吸取限制性內(nèi)切酶時(shí)，每次都要用新的吸管頭。

限制性內(nèi)切酶一旦拿出冰箱后應(yīng)當(dāng)立即置于冰上。酶應(yīng)當(dāng)是最后一個(gè)被加入到反應(yīng)體系中（在加入酶之前所有的其它反應(yīng)物都應(yīng)當(dāng)已經(jīng)加好并已預(yù)混合）。

10×bf工作濃度為1×，注意混勻。

酶切時(shí)所加的DNA溶液體積不能太大，否則DNA溶液中其他成分會(huì)干擾酶反應(yīng)。

酶通常保存在50%的甘油中，實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)將反應(yīng)液中甘油濃度控制在1/10之下，否則，酶活性將受影響。

如果反應(yīng)較長(zhǎng)時(shí)間而酶切體系又很小比如10微升，那么哪怕用PCR小管做反應(yīng)，體積損失也會(huì)很大。采用石蠟油覆蓋的方法可避免水分損失甘油濃度提高而引起的星活性。& O; c$ }  H8

混合：這是非常重要然而常常被忽略的一步。想要反應(yīng)完，必須使反應(yīng)液充分混合。我們推薦用槍反復(fù)吸取混合，或是用手指輕彈管壁混合，然后再快速離心一下即可。

注意：不可振蕩。

蘇州阿爾法生物提供的實(shí)驗(yàn)試劑主要有：

1.細(xì)胞類產(chǎn)品：

各種的腫瘤細(xì)胞、基因編輯細(xì)胞：比如常見(jiàn)的HEK293細(xì)胞、CHO細(xì)胞、骨髓干細(xì)胞、胚胎2.天根試劑盒產(chǎn)品：天根系列試劑盒主要有質(zhì)粒大提、質(zhì)粒小提等各種質(zhì)粒抽提試劑盒、血液DNA提取試劑盒、細(xì)菌DNA提取試劑盒、病毒RNA提取試劑盒、植物組織DNA提取試劑盒等各種基因組提取試劑盒。還有DH5&/TOP-10感受態(tài)等。

3. 其他試劑類：細(xì)胞培養(yǎng)試劑、分子生物學(xué)試劑、緩沖液、培養(yǎng)基、抗體、碧云天試劑等。

更多 DNA酶切實(shí)驗(yàn)步驟、生化試劑購(gòu)買 請(qǐng)進(jìn)入蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司網(wǎng)站進(jìn)行了解