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光學顯微鏡的觀察方式

更新時間:2024-05-31點擊次數(shù):970

光學顯微鏡適用于多種檢材,如組織切片、活細胞、電路板等。不同檢材光學特性差異大,需使用不同觀察方式,主要有明場、相差、熒光、偏光、DIC、暗場、霍夫曼相襯七種方式。


一臺光學顯微鏡可能擁有一種或多種觀察方式,今天我們先來說說明場觀察方式。


(1)成像原理

明場觀察是光學顯微鏡最基礎的觀察方式,其利用可見光(約400-700nm)作為照明光源,光線相位、照射角度等性質不作改變,直接照射在樣品上進行成像。


明場觀察有透射照明和反射照明兩種照明方式,前者是照明光線透過樣品后進入物鏡,主要適合有透明度的薄樣品;后者是照明光線照射到樣品后反射進入物鏡,主要適合不透明的厚樣品。


透射與反射(落射)光路示意圖


(2)關鍵部件
  明場觀察不需要特殊的部件,其效果主要受光源和聚光鏡影響。光源有兩項核心規(guī)格,色溫和顯色性。聚光鏡核心規(guī)格是數(shù)值孔徑。

傳統(tǒng)以鹵素燈等作為光源,其特點是色溫偏暖,約3000K,亮度越低色溫越暖。人眼觀察較為舒適,顯色性高,但一般需要在光源處使用 RBD 日光濾光片或藍色濾光片校正色溫,否則對于樣本中紅染、黃染等細節(jié)的分辨很差。主要缺點是發(fā)熱大、使用不當容易燒,另外用 濾色片 校正色溫會損失光強,對拍照有影響。 


使用技巧:關鹵素燈光源前先把光強調低。以高光強啟動鹵素燈容易導致燈泡燒壞,調低光強再關,可以避免下次開燈時意外燒壞燈泡。LED光源則基本不影響,但養(yǎng)成好習慣總是有益的。

  目前專業(yè)LED光源已逐步成為主流,其色溫恒定在5000K左右,接近日光的平均色溫,顯色性較好,人眼觀察和數(shù)字相機成像都有較好效果。此外LED光源功耗低亮度高,一般3W LED可以達到30W鹵素燈光強,方便即開即用,壽命長,免維護,因此明美大部分顯微鏡均默認采用LED作為明場光源,鹵素燈則作為可選。

鹵素燈照明右圖LED燈照明

   聚光鏡會有倍數(shù)刻度或者數(shù)值孔徑刻度,一般調到物鏡對應的倍數(shù),或者比物鏡數(shù)值孔徑稍低的數(shù)值即可。更精準的調試方式,拔出目鏡,邊調節(jié)孔徑光闌邊從觀察筒觀察物鏡后焦平面,當畫面占視野3/4左右時效果好,但不建議頻繁這樣操作,因為容易讓觀察筒進灰。


  產品小知識1:除了數(shù)值孔徑,聚光鏡還有消色差、消球差等規(guī)格區(qū)別,在40X以上會對成像質量有較大影響,所以并不是數(shù)值孔徑高就等于更好。


產品小知識2:如果您想使用超低倍2X物鏡,您需要選配搖出式聚光鏡。


(3)成像特點

明場觀察能較好地呈現(xiàn)樣品色彩,但襯度較低,尤其是透射照明的明場中。在透射照明成像過程中,帶有樣品信息的光線與背景光線混合在一起,這使樣品淺色部分與背景對比度較低,遇到活細胞等透明樣品基本看不出細節(jié)。因此,該觀察方式適合已經染色樣品或本身有顏色的樣品進行成像。

特點jpg

(4)主要應用
①醫(yī)學研究:HE、IHC等染色病理切片檢驗

組織切片


明美研究級生物顯微鏡ML51-N明場觀察樣品圖

左圖:HE 組織病理切片樣品  右圖:IHC 免疫組化樣品


②材料分析:金相組織 、電路芯片等。

金相顯微鏡

明美金相顯微鏡MJ43



明美顯微鏡
明美體視顯微鏡MZX100拍攝的蜜蜂

(5)明美產品推薦
①生物顯微

推薦產品:ML11/ML31/ML41/ML51

生物顯微鏡


  • 配置白光LED光源,成像明亮清晰
  • 采用無限遠光路系統(tǒng),可靈活升級配置
  • 適用于教學、科研、醫(yī)學等場景



②金相顯微鏡

推薦產品:MJ31/MJ33/MJ43/MJ41-LED/MJ42

金相顯微鏡

  • 可配置LED或鹵素燈等光源,滿足不同觀察習慣
  • 配置長工作距離金相物鏡,成像清晰,對比度高
  • 適用于工業(yè)、材料學等觀察場景

③體式顯微鏡

推薦產品:MZ62/MZ101

體視顯微鏡


  • 獨立雙光路系統(tǒng)設計,成像具有立體感
  • 可配備透射與反射LED光源,適配不同檢材
  • 可適用于常規(guī)生物醫(yī)學檢驗,科研研究和工業(yè)檢測等高精度觀察領域



④顯微鏡相機

推薦產品:MSX11/ MSX2 /MSX1/MDX

顯微鏡相機


  • 大靶面尺寸感光芯片,高像素設計,細節(jié)成像更清晰
  • 靈敏度高,色彩還原性好
  • 軟件易用,可搭配明美及其他品牌顯微鏡

透射與反射(落射)光路示意圖

明美顯微鏡

生物顯微鏡

生物顯微鏡


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