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CHO細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶后長勢不好原因分析及解決方案

更新時(shí)間:2024-06-05點(diǎn)擊次數(shù):890

在生物制藥領(lǐng)域,CHO(中國倉鼠卵巢)細(xì)胞是常用的宿主細(xì)胞,用于生產(chǎn)重組蛋白藥物。然而,在CHO細(xì)胞的培養(yǎng)過程中,有時(shí)會(huì)遇到細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶后長勢不佳的問題。這種情況可能會(huì)影響藥物的生產(chǎn)效率和產(chǎn)品質(zhì)量。本文將分析可能導(dǎo)致 CHO細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶后長勢不佳的原因,并提出相應(yīng)的解決方案。

CHO細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶后長勢不好的原因主要有以下幾點(diǎn):

1.環(huán)境變化:細(xì)胞在轉(zhuǎn)瓶過程中,可能會(huì)遇到溫度、濕度、氧氣和二氧化碳濃度等環(huán)境因素的變化。這些變化可能會(huì)對細(xì)胞的生長狀態(tài)產(chǎn)生影響。例如,溫度的波動(dòng)可能導(dǎo)致細(xì)胞代謝途徑的改變,濕度的變化可能會(huì)影響細(xì)胞的滲透壓平衡,氧氣和二氧化碳濃度的波動(dòng)可能會(huì)影響細(xì)胞的呼吸和酸堿平衡。因此,維持穩(wěn)定的培養(yǎng)環(huán)境對于細(xì)胞的生長比較重要。

2.營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足:轉(zhuǎn)瓶后,細(xì)胞可能會(huì)面臨營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足的問題。尤其是葡萄糖、氨基酸和維生素等關(guān)鍵營養(yǎng)素的缺乏,可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞能量供應(yīng)不足,影響細(xì)胞的生長和代謝。因此,在轉(zhuǎn)瓶后,需要及時(shí)補(bǔ)充足夠的營養(yǎng)物質(zhì),以滿足細(xì)胞的生長需求。

3.代謝廢物積累:細(xì)胞代謝產(chǎn)生的廢物,如乳酸和氨,如果在轉(zhuǎn)瓶后不能及時(shí)清除,可能會(huì)對細(xì)胞生長產(chǎn)生不利影響。這些廢物積累過多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)環(huán)境惡化,影響細(xì)胞的生長和生產(chǎn)力。因此,定期更換培養(yǎng)基,及時(shí)清除代謝廢物,可以使細(xì)胞維持良好的生長狀態(tài)。

4.細(xì)胞密度和競爭:轉(zhuǎn)瓶后,細(xì)胞密度可能會(huì)增加,導(dǎo)致細(xì)胞間的競爭加劇。過高的細(xì)胞密度可能會(huì)導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)的消耗過快,代謝廢物的積累增多,以及細(xì)胞間的接觸抑制現(xiàn)象。這些因素都會(huì)影響細(xì)胞的生長和生產(chǎn)力。因此,在轉(zhuǎn)瓶前,需要控制細(xì)胞的密度,避免過高的細(xì)胞密度對生長產(chǎn)生不利影響。

5.無菌條件:轉(zhuǎn)瓶過程中的無菌操作不當(dāng)可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞污染。細(xì)胞污染會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞的生長狀態(tài),甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡。因此,在轉(zhuǎn)瓶過程中,需要嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程,包括對培養(yǎng)器具的消毒、操作人員的無菌操作技術(shù)等,以防止細(xì)胞污染的發(fā)生。

細(xì)胞培養(yǎng)瓶

轉(zhuǎn)瓶后細(xì)胞長勢弱的優(yōu)化解決方案:

1. 優(yōu)化培養(yǎng)環(huán)境:確保轉(zhuǎn)瓶后的培養(yǎng)環(huán)境(如溫度、濕度、氧氣和二氧化碳濃度)與原培養(yǎng)環(huán)境一致,減少環(huán)境變化對細(xì)胞的影響。

2. 調(diào)整培養(yǎng)基配方:根據(jù)細(xì)胞的營養(yǎng)需求,調(diào)整培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分,確保細(xì)胞在轉(zhuǎn)瓶后能夠獲得充足的營養(yǎng)供應(yīng)。

3. 定期更換培養(yǎng)基:定期更換培養(yǎng)基,以清除代謝廢物,保持培養(yǎng)環(huán)境的穩(wěn)定。

4. 控制細(xì)胞密度:在轉(zhuǎn)瓶前,控制細(xì)胞的密度,避免過高的細(xì)胞密度對生長產(chǎn)生不利影響。

5. 加強(qiáng)無菌操作:在轉(zhuǎn)瓶過程中,嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程,防止細(xì)胞污染。

   此外,可以使用一些商業(yè)化的添加劑和設(shè)備來促進(jìn)CHO細(xì)胞的生長,如使用InstiGROInstiSHAKEInstiTHAW促細(xì)胞生長劑。

- InstiGRO:這是一種促進(jìn)CHOHEK單細(xì)胞生長的添加劑,可以提高克隆效率,加速手動(dòng)鋪板后細(xì)胞的生長。與Solentim VIPS系統(tǒng)結(jié)合使用,可以實(shí)現(xiàn)自動(dòng)單細(xì)胞鋪板,從而提高細(xì)胞株開發(fā)的效率。

- InstiSHAKE:這是一種專為CHOHEK細(xì)胞設(shè)計(jì)的振蕩培養(yǎng)補(bǔ)充劑,可以提高細(xì)胞活力,加速細(xì)胞生長,有助于生產(chǎn)更高密度的培養(yǎng)物,并在一系列培養(yǎng)基中提供批次間的一致性。

- InstiTHAW:這是一種用于冷凍保存細(xì)胞的添加劑,旨在保護(hù)CHOHEK細(xì)胞在冷凍和解凍過程中的活力,確保細(xì)胞在冷凍保存后獲得理想的恢復(fù)率。

當(dāng)CHO細(xì)胞在轉(zhuǎn)瓶后出現(xiàn)生長不良時(shí),可以通過優(yōu)化培養(yǎng)環(huán)境、調(diào)整培養(yǎng)基配方、定期更換培養(yǎng)基、控制細(xì)胞密度、加強(qiáng)無菌操作以及使用商業(yè)化添加劑和設(shè)備等方法來解決問題。通過這些措施,可以有效地改善CHO細(xì)胞的生長狀態(tài),提高藥物生產(chǎn)的效率和產(chǎn)品質(zhì)量。

蘇州阿爾法生物16年專注實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備、生物試劑、實(shí)驗(yàn)耗材的供應(yīng)商。所提供的細(xì)胞系開發(fā)設(shè)備主要包括:單細(xì)胞測序儀、納米粒度儀、單細(xì)胞鋪板驗(yàn)證儀,活細(xì)胞成像儀,  iPSC基質(zhì)膠,細(xì)胞生長因子等。


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