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高通量 BLI 分子互作儀:破解抗體篩選與分子互作分析的核心痛點

更新時間:2025-06-23點擊次數(shù):186

高通量 BLI 分子互作儀:破解抗體篩選與分子互作分析的核心痛點

一、抗體篩選與分子互作研究中的典型難題

在生物醫(yī)藥研發(fā)中,無論是抗體藥物開發(fā)、靶點篩選,還是 AAV 病毒載體優(yōu)化,科研人員常面臨以下挑戰(zhàn):

 

1. 通量瓶頸:傳統(tǒng)方法(如 ELISA、SPR)單次實驗僅能處理數(shù)十至數(shù)百個樣本,面對 thousands of 候選抗體或靶點時,篩選周期長達數(shù)周甚至數(shù)月。

2. 標記干擾:熒光或放射性標記可能改變分子天然構(gòu)象,導(dǎo)致親和力 / 動力學(xué)數(shù)據(jù)失真,尤其在復(fù)雜樣本(如血清、細胞裂解液)中干擾更顯著。

3. 復(fù)雜基質(zhì)兼容性差:傳統(tǒng)技術(shù)難以直接分析含雜質(zhì)的樣本,需額外純化步驟,增加時間成本與樣本損耗。

4. 表位分組效率低:傳統(tǒng)方法進行表位分析時,需分步實驗,無法實現(xiàn)多抗體并行比對,難以快速鎖定高特異性克隆。

二、BLI 分子互作儀的技術(shù)突破:高通量 + 精準 + 非標記

蘇州阿爾法生物提供的高通量 BLI 分析系統(tǒng),以三大核心優(yōu)勢直擊痛點:

1. 超高通量:1152 樣本 / 次,8 小時完成表位分組

· 32 通道并行檢測技術(shù):單次運行可同時分析 32 組獨立實驗,搭配 96 孔板自動化進樣,單次處理 1152 個樣本,較傳統(tǒng) SPR 效率提升 10 倍以上。

· 典型應(yīng)用:抗體表位分組實驗

· 傳統(tǒng)流程:需多次上機、分步檢測,完成 32×32 抗體組合分析需 2-3 天。

· BLI 方案:8 小時內(nèi)同步完成 32 個抗體與 32 個抗原的交叉互作檢測,通過動力學(xué)數(shù)據(jù)(如 KD 值、結(jié)合 / 解離速率)快速分組,篩選出具有不同表位的抗體克隆。

2. 非標記檢測:保留分子天然活性,適配復(fù)雜樣本

· 原理優(yōu)勢:基于生物膜干涉技術(shù),無需對樣本(抗體、抗原、血清等)進行標記,直接監(jiān)測分子結(jié)合時的光程變化,數(shù)據(jù)真實反映天然互作狀態(tài)。

· 典型場景解決方案

· 痛點:血清中的抗體檢測需去除干擾蛋白,否則標記物易與雜質(zhì)結(jié)合導(dǎo)致假陽性。

· BLI 方案:直接將血清樣本上機,非標記技術(shù)避免雜質(zhì)干擾,實時動態(tài)監(jiān)測目標抗體與抗原的結(jié)合動力學(xué),數(shù)據(jù)可信度提升 90% 以上。

3. 精準動力學(xué)分析:從親和力到作用機制全覆蓋

· 實時動態(tài)監(jiān)測:可同步獲取親和力(KD)、結(jié)合速率(kon)、解離速率(koff)等參數(shù),助力抗體優(yōu)化(如篩選慢解離抗體)或靶點成藥性評估。

· 案例:AAV 病毒載體開發(fā)

· 需求:評估 AAV 衣殼蛋白與宿主細胞受體的結(jié)合強度,優(yōu)化載體靶向性。

· BLI 應(yīng)用:將受體蛋白固定于傳感器,實時監(jiān)測不同 AAV 突變體的結(jié)合動力學(xué),快速篩選出親和力更高的載體變體,縮短載體優(yōu)化周期 50%。

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三、BLI 技術(shù)在具體實驗步驟中的應(yīng)用解析

以 “抗體篩選全流程" 為例,看 BLI 如何提升各環(huán)節(jié)效率:

1. 靶點初篩:從千到百的快速過濾

· 實驗步驟:將候選抗原固定于 BLI 傳感器,同時孵育 1000 + 雜交瘤細胞培養(yǎng)上清(無需純化)。

· BLI 優(yōu)勢32 通道并行檢測,2 小時內(nèi)鎖定 200 + 有結(jié)合活性的抗體樣本,較 ELISA 省去洗板、標記等繁瑣步驟。

2. 親和力與動力學(xué)表征:精準排序候選抗體

· 實驗步驟:對初篩陽性抗體進行濃度梯度滴定(如 10nM-10μM),監(jiān)測結(jié)合 - 解離曲線。

· 數(shù)據(jù)價值:獲取 KD 值(如 pM 級高親和力抗體)、koff 值(篩選長效抗體),為下游成藥性評估提供關(guān)鍵依據(jù)。

3. 表位分組與交叉反應(yīng)分析

· 實驗步驟:采用 “抗原競爭法",將 32 個抗體與同一抗原混合,通過 BLI 檢測結(jié)合抑制率,繪制表位分布圖。

· 效率對比:傳統(tǒng)方法需手動分組實驗 4-5 天,BLI 系統(tǒng) 8 小時內(nèi)完成全組合分析,直接輸出表位分組聚類圖。

 

四、常見問題解決方案:

Q1:非標記技術(shù)在復(fù)雜樣本中如何避免背景干擾?

 

· ABLI 傳感器具有高特異性表面修飾(如 NTA、Protein A),僅捕獲目標分子(如 His 標簽蛋白、IgG 抗體),且實時基線校正算法可自動扣除基質(zhì)背景,無需額外純化樣本。

 

Q2:高通量檢測是否會犧牲數(shù)據(jù)精度?

 

· A32 通道獨立控溫(±0.1℃)、光信號實時校準,動力學(xué)參數(shù)(KD)重復(fù)性誤差<5%,與單通道 SPR 數(shù)據(jù)高度吻合(R2>0.95)。

 

Q3:AAV 載體分析中,如何解決病毒顆粒大、結(jié)合信號弱的問題?

 

· ABLI 提供大分子量專用傳感器(如長鏈 NTA),增大病毒顆粒捕獲效率,配合高靈敏度光信號檢測,可精準監(jiān)測 pM 級 AAV - 受體互作。


作為 BLI 分子互作儀的專業(yè)供應(yīng)商,蘇州阿爾法生物可提供:


· 硬件優(yōu)勢:32 通道高通量機型 + 自動化樣本處理系統(tǒng),適配從小規(guī)模驗證到大規(guī)模篩選的全場景需求。

· 技術(shù)服務(wù):免費提供方法開發(fā)、實驗設(shè)計及數(shù)據(jù)分析培訓(xùn),助力客戶快速落地高通量篩選方案。

· 行業(yè)案例:已協(xié)助抗體藥企、基因治療公司縮短篩選周期 40%-60%,成功應(yīng)用于 PD-1 抗體優(yōu)化、AAV9 載體親和力提升等項目。

若您在抗體篩選、AAV 載體開發(fā)或靶點驗證中面臨通量與精度的挑戰(zhàn),歡迎聯(lián)系蘇州阿爾法生物,

解鎖高通量分子互作分析新體驗獲取定制化 BLI 解決方案。

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0512-62956104

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